Возможность изменения методики?

[Demiurg]

Здравствуйте!
Не знаю, в ту ли ветку форума размещаю пост, но вопрос вроде как около биохимический.

Вопрос в следующем. Есть методики по определению оксидативных/антиоксидантных свойств биологических образцов с использованием N,N-диметил-п-фенилендиамина (DMPD) и хлорида железа (II и III). Сами методики в прикрепленных статьях.
Так вот, а можно ли в этих методиках хлориды Fe (II) и Fe (III) заменить на сульфаты Fe (II) и Fe (III)? Т.е. если вот в методике используется FeCl3 - можно ли его заменить на Fe2(SO4)3?
Насколько мне представляется, важно (в первую очередь) наличие ионов Fe3+ и Fe2+ (и их концентрация), а противоионы (хлорид или сульфат) не играют определяющей роли? Если то, какие соли (хлориды или сульфаты) не принципиально, то как быть в случае замены FeCl3 на Fe2(SO4)3 - при одной и той же молярной концентрации солей, в случае использования FeCl3 в растворе концентрация ионов Fe3+ будет равна молярной концентрации соли, а в случае использования Fe2(SO4)3 ионов Fe3+ в растворе будет в 2 раза больше в сравнении с использованием хлорида.
Measurement of the Oxidative Status
A 100-mM solution of DMPD was prepared dissolving 209 mg of DMPD dihydrochloride salt in 10 ml of deionised water. The 0.1-M DMPD solution can be stored at 2208C for more than 1 month. Its title is stable up to 12 h in an ice-bath in the dark. The assay was performed in a plastic tube adding 20ml of DMPD (final concentration 1 mM) and 10ml of the plasma sample to 2 ml of 0.1 M acetate buffer at pH 4.8. The mixture was incubated at 37C for 75 min. The formation of the coloured DMPD radical cation was monitored reading the absorbance at 505 nm
Definition of Unit of Measure for Oxidative Status
To express oxidative status of the samples analysed, 5ml of a solution of FeCl22.52 mM and 5mlofH2O2 at different concentrations (from 0.041 to 40.6mM) were added to a plastic tube containing 20ml of a PBS buffer solution. After 2 min, the content of the plastic tube was transferred to 2 ml of a 1-mM solution of
DMPD in buffer acetate pH 4.8 (final Fe 2+ concentration 6.2mM, final H2O2 concentration between 0.1 and 0.0001mM). The colour development was related to the H2O2 concentration and a calibration curve was built up.
Measurement of Antioxidative Ability by the DMPD
Method.DMPD, 100 mM, was prepared by dissolving 209 mg of DMPD in 10 mL of deionized water; 1 mL of this solution was added to 100 mL of 0.1 M acetate buffer, pH 5.25, and the colored radical cation (DMPD+) was obtained by adding 0.2 mL of a solution of 0.05 M ferric chloride (final concentration 0.1 mM). One milliliter of this solution was directly placed in a 1-mL plastic cuvette and its absorbance at 505 nm was measured. An optical density of 0.900(0.100 unit of absorbance was obtained and it represents the uninhibited signal. The optical density of this solution, which is freshly prepared daily, is constant up to 12 h at room temperature. Standard solutions of the different antioxidant compounds were prepared as follows: 1 mg/mL of ascorbic acid was prepared by dissolving 0.1 g of ascorbic acid in 100 mL of deionized water; 1 mg/mL of TROLOX was prepared by dissolving 0.1 g of TROLOX in 100 mL of methanol. Fifty microliters of standard antioxidants or of wine samples (diluted in water 1:20 for the red wines, undiluted for the white wines) were added in the spectrometric cuvette and after 10 min at 25 °C under continuous stirring the absorbance at 505 nm was measured. The buffered solution was placed in the reference cuvette.

Спасибо!

[uchebnik fiziki]

а вы попробуйте на десятке-другом стандартов, убедитесь, что результаты одинаковые, и смело меняйте.

[Vanya Ivanov]

Замена безусловно возможна, но с учетом - растворимости, т.к. здесь очень разная растворимость солей железа.
Далее ... в водных растворах соли железа не живут, а сразу гидролизуются и образуют мицеллы ... ясно да?
Мицеллы хлоридов устойчивые, т.к. противоион однозарядный. Ваш ацетатный буфер при текущей конц. и рН 4.8, не завалит хлоридные мицеллы в осадок. Устойчивость мицелл с сульфатными противоионами много меньше - т.к. SO4 2+ двухзарядные и т.д. и т.п. Если при конц. в рабочих растворах и текущем рН мицеллы начнут агрегироваться в осадок ну тогда увы и ах ... Предсказать очень сложно ... ну кто тут вам будет делать расчеты стабильности мицелл в буферах? Попробуйте ...
А с точки зрения биохимии - сульфаты в этих ферментных процессах вроде нигде не выступают как регуляторы .... я не встречал. Может у кого то есть еще сведения?