Тиоацетилирование Fmoc-Lys-OH

[Nickolas]

Уважаемые коллеги!

Помогите разобраться с реакцией тиоацетилирования Fmoc-лизина.
К гидрохлориду Fmoc-лизина, растворенному в ДМФА, прибавили 2,2 эквивалента триэтиламина и 1,5 эквивалента этил дитиоацетата. Смесь позеленела (комплекс ТЭА-дитиоацетат?) и через пять минут стала желтой. Смесь мешали еще 10 минут и анализировали (HPLC), На хроматограмме чистый продукт и избыток дитиоэфира. Смесь разбавили водой, добавили немного соды, экстрагировали эфиром пару раз. Эфирные вытяжки отбросили (там дитиоэфир и некислотные примеси). После подкисления лимонной кислотой выделилось желтоватое масло, которое экстрагировали ДХМ. Промывали водой, сушили сульфатом натрия, ДХМ упарили.
Сделали еще раз HPLC-анализ: чистое вещество - один пик. Эту фракцию отобрали и отдали на масс-анализ. А там жирный пик с массой 489 и совсем небольшой с 427. Разница в 62 (этилмеркаптан?).
Аддукт этилдитиоэфира и фмок-лизина?

reaxn.gif

[Semenych]

Какой метод ионизации использовали? У меня на MALDI бывало, что хроматографически чистое вещество дает кучу пиков и лишь меньший по интенсивности соответствует продукту. При оптимизации условий съемки масс-спектра картина координально менялась.

[Nickolas]

ESI. Пробовали разную энергию. Так сказали. Хотя весьма вероятно, что проблема именно в аналитике.

[Cherep]

На хроматограмме чистый продукт и избыток дитиоэфира

Слушайте, Fmoc в УФ светит -- это да.
А вот тиоэфир так хорошо поглощает?
На какой длинне волны, кстати?

[maks]

а ЯМР водородный и углеродный в порядке ?
если да можно раслабиться ,вероятно

[Nickolas]

2 Cherep: Имелась в виду аналитическая HPLC. Дитиоэфир поглощает в районе 308 нм.
2 Макс: Увы, доступа к ЯМР в данный момент нету

[Semenych]

В ESI ионные соединения хорошо видно, типа соли. А для этого MALDI лучше. Но в любом случае без ЯМРа плохо.

[Nickolas]

Ситуация прояснилась. Проблема была в анализе.

Всем спасибо!