трипсин vs химотрипсин

[dan14444]

чтобы не копать сиквенсы:
надо неспецифично подъесть гликопротеиды, из ферментов под рукой упомянутые два. кто из них ко второму более устойчив? дабы определить, в каком порядке добавлять.

И чем бы их потом инактивировать, не убив мембраны?

[Upstream]

Дэн, боюсь, что задачка не вполне тривиальная: грызть неденатурированные белки... лучше поискать специалистов, скажем, на молбиол.ру.
Если самотоятельно врубаться, то лучше начинать с отличной ферментной базы:

Код: Выделить всё

http://www.brenda-enzymes.org/

Попробуйте ещё загуглить хорошую комбинацию ключевых слов - наверняка попадёте в подходящую статью.

[dan14444]

Та не в этом задача, просто мож кто в курсе, кто раньше сдохнет - трипсин от химотрипсина или наоборот. Или им пофиг.

И чем их ингибировать, не трогая мембраны и амины... мож тупо денатурировать pH-ом?.. Или тиолы окислить, если у них есть функциональные?...

[avor]

Та не в этом задача, просто мож кто в курсе, кто раньше сдохнет - трипсин от химотрипсина или наоборот. Или им пофиг.
И чем их ингибировать, не трогая мембраны и амины... мож тупо денатурировать pH-ом?.. Или тиолы окислить, если у них есть функциональные?...

Химотрипсин менее специфичен(более всеяден), чем трипсин, в кишечнике они вроде вместе живут, но трипсин вроде как активирует химотрипсин(из предшественника), точно не помню. Эти ферменты оба сериновые протеазы ингибируются диизпропилфторфосфатом и фенилметиленсульфонилфторидом.

[dan14444]

Интересная идея ингибирования... Но ограничусь пока менее... суровыми методами .

[avor]

Интересная идея ингибирования... Но ограничусь пока менее... суровыми методами .

PMSF вполне безобидная штюка. Могу отсыпать, но вы вроде в Иркутске, а я в Питере. А надо ее 0.5мМ копейки короче.