ищу паспорт на ВЭЖХ колонку

физико-химические методы исследования, методики и другие вопросы аналитической химии
analytical chemistry, analysis and techniques for professionals
Ответить
romanosow
Сообщения: 102
Зарегистрирован: Вт июл 21, 2015 3:37 pm

ищу паспорт на ВЭЖХ колонку

Сообщение romanosow » Чт май 23, 2019 4:53 pm

Добрый день! потерял паспорт на колонку Restek Pinnacle II C18 110Å 5µm, 4.6 x 150mm. Может быть есть у кого-нибудь, хочу посмотреть в каком состоянии колонка.

vmu
Сообщения: 119
Зарегистрирован: Ср июн 06, 2012 6:31 pm

Re: ищу паспорт на ВЭЖХ колонку

Сообщение vmu » Чт май 23, 2019 8:51 pm

Получи'те хроматограмму стандартного раствора или раствора для проверки пригодности хроматографической системы (ППХС) по той методике, для которой предполагается использовать данную колонку, и увидите, удовлетворяет ли колонка требованиям этой методики. Либо возьмите условия из имеющейся под рукой тест-хроматограммы другой C18-колонки.
Для того чтобы понять, что колонка сдохла, много не надо: элюент 60-70% ацетонитрила в воде, 1-2 мл/мин, тест-раствор - 100-1000 мкг/мл толуола в элюенте, объем пробы - 1-10 мкл, УФ детектор на длине волны 200-260 нм. Если получите меньше 5000 тарелок и фактор асимметрии пика, сильно отличный от 1.0, - считайте, что колонка свой ресурс исчерпала.

romanosow
Сообщения: 102
Зарегистрирован: Вт июл 21, 2015 3:37 pm

Re: ищу паспорт на ВЭЖХ колонку

Сообщение romanosow » Пт май 24, 2019 8:22 am

благодарю ха ответ!!! так и сделаю

StYV
Сообщения: 2750
Зарегистрирован: Пн окт 24, 2005 11:43 pm

Re: ищу паспорт на ВЭЖХ колонку

Сообщение StYV » Сб май 25, 2019 8:26 pm

Фирма-производитель известна?
Зайти на ее сайт и там как правило все расписано.
Ну или искать в инете по названию. Наберите это "Restek Pinnacle II C18" и вывалится куча инфы.
Да и раньше как правило эффективность определяли по пирену.
С уважением StYV.

romanosow
Сообщения: 102
Зарегистрирован: Вт июл 21, 2015 3:37 pm

Re: ищу паспорт на ВЭЖХ колонку

Сообщение romanosow » Пн май 27, 2019 10:44 am

прогнал толуол (30% воды), вышел сдвоенный пик. До этого тоже начались проблемы - вещества лезли удвоенные. Проблемы начались когда в элюента стало 70% воды (30 ACN), до этого гонял на 15% воды. Блин неужели осел наполнитель? Возможно ли как нибудь попробовать регенерировать колонку?
У вас нет необходимых прав для просмотра вложений в этом сообщении.

vmu
Сообщения: 119
Зарегистрирован: Ср июн 06, 2012 6:31 pm

Re: ищу паспорт на ВЭЖХ колонку

Сообщение vmu » Пн май 27, 2019 6:30 pm

Неплохо было бы указать, какие конкретно условия вы использовали из предложенного диапазона, и указать высоту полученного пика (хотя на зашкал не похоже). Колонку вашу водой (а тем более 30 % ацетонитрила в воде) не убьешь. Если с хроматографом все в порядке, то скорее всего образовалась полость в колонке, хотя она могла и грязью из проб подпортиться. С какими пробами работали? Предколонкой не пользовались? Колонку не роняли? Резко на высокую скорость потока не врубали? Давление на колонке не выросло после ваших проб? Какие pH подвижной фазы, температуры? Колонку после работы перемывали на подвижную фазу без солей, кислот, оснований? Если полость на входе в колонку, то ее можно засыпать сорбентом или инертным материалом, но это уже шаманство и временная мера. Если колонка загрязнилась компонентами проб, можно помыть сильным элюентом (ацетонитрилом, изопропанолом), в т.ч. в обратном направлении (правда, это не для всех колонок можно, а если можно, то осторожно). Чтобы исключить проблему с хроматографом, получите хроматограмму в тех же условиях, на том же приборе, но с аналогичной, заведомо рабочей колонкой.

Аватара пользователя
Commander L
Сообщения: 2148
Зарегистрирован: Вс ноя 11, 2012 4:00 pm
Контактная информация:

Re: ищу паспорт на ВЭЖХ колонку

Сообщение Commander L » Пн май 27, 2019 10:54 pm

Ошибся.
Alea jacta est.
"О, утраченныи, ветром оплаканныи призрак! Вернись!! Вернись!!" Т.Вулф
"Я боюсь стать таким, как взрослые, которым ничто не интересно, кроме цифр." А. де Сент-Экзюпери

romanosow
Сообщения: 102
Зарегистрирован: Вт июл 21, 2015 3:37 pm

Re: ищу паспорт на ВЭЖХ колонку

Сообщение romanosow » Вт май 28, 2019 11:02 am

vmu писал(а):
Пн май 27, 2019 6:30 pm
Неплохо было бы указать, какие конкретно условия вы использовали из предложенного диапазона, и указать высоту полученного пика (хотя на зашкал не похоже). Колонку вашу водой (а тем более 30 % ацетонитрила в воде) не убьешь. Если с хроматографом все в порядке, то скорее всего образовалась полость в колонке, хотя она могла и грязью из проб подпортиться. С какими пробами работали? Предколонкой не пользовались? Колонку не роняли? Резко на высокую скорость потока не врубали? Давление на колонке не выросло после ваших проб? Какие pH подвижной фазы, температуры? Колонку после работы перемывали на подвижную фазу без солей, кислот, оснований? Если полость на входе в колонку, то ее можно засыпать сорбентом или инертным материалом, но это уже шаманство и временная мера. Если колонка загрязнилась компонентами проб, можно помыть сильным элюентом (ацетонитрилом, изопропанолом), в т.ч. в обратном направлении (правда, это не для всех колонок можно, а если можно, то осторожно). Чтобы исключить проблему с хроматографом, получите хроматограмму в тех же условиях, на том же приборе, но с аналогичной, заведомо рабочей колонкой.
У вас нет необходимых прав для просмотра вложений в этом сообщении.

romanosow
Сообщения: 102
Зарегистрирован: Вт июл 21, 2015 3:37 pm

Re: ищу паспорт на ВЭЖХ колонку

Сообщение romanosow » Вт май 28, 2019 11:08 am

блин сообщение не сохранилось. вообщем 1000мг/мл толуол, 5 мкл закол, 54 mAu высота пика, смотрю эфиры цианатов как на фото примерно, единственно могут быть примест триэтиламмоний бромида, работал всегда ацетонитрил-вода, в последнее время в основном 15% воды. На фото ниже хроматограмма при изменении элюента до 60% вода, после этого давление упало с 48 бар до 36 бар (при прогоне 15% воды), видно в начале как что-то выходит. Изначально давление в системе было также 36-37 бар при 15% воды. Однако постепенно стало расти. На выходные оставил колонку в ацетонитриле, в понедельник давление опять выросло с 36 до 48 бар (15% воды). До прогона элюента 60% воды двоения не было, однако сейчас появилось.

vmu
Сообщения: 119
Зарегистрирован: Ср июн 06, 2012 6:31 pm

Re: ищу паспорт на ВЭЖХ колонку

Сообщение vmu » Ср май 29, 2019 7:14 am

У вашей колонки мертвый объем в районе 1.3 - 1.7 мл, т.е. мертвое время на скорости 1 мл/мин равно около 1.3 - 1.7 мин. Пики в начале вашей предыдущей хроматограммы, скорее всего, какая-та неудерживаемая или слабоудерживаямая бяка. Ваше вещество довольно гидрофобно и в ваших условиях (градиент с 85 до 40 % ацетонитрила???! а должно быть наоборот: увеличение доли ACN в ПФ!), по-видимому, вообще не элюируется (+ какая концентрация? какая длина волны?). Попробуйте для вашего вещества для начала градиент от 15 % ACN до 100 % ACN за 40 минут на 1 мл/мин. Детектор на 210 нм. Растворителем для пробы в идеале должна быть ПФ начального состава, либо если в пробе ацетонитрила сильно больше, чем в начальной ПФ, вводите в колонку меньший об'ем.
Что касается двоения пиков, то, возможно, у вас просто-напросто где-то плохо прикручены капилляры в хроматографе (например, к колонке).

Ответить

Вернуться в «аналитическая химия / analytical chemistry»

Кто сейчас на конференции

Сейчас этот форум просматривают: нет зарегистрированных пользователей и 2 гостя