Есть методика для газохроматографического определение углеводов с их предварительным силированием, текст методики привожу ниже. Кто занимался и может высказать соображения на тему? Существует проблема: наличие воды в пробах, будет ли это сильно влиять на определение, ибо выпаривать на роторе долго, нудно и главное проблематично. Буду благодарен за отзывы.
P.S.: на момент написания данного сообщения осознаю, что немного запутался в терминологии: силирование, силиирование, силанизирование или может силицирование (хотя последнее это покрытие поверхностей кремнием вроде)? И еще как этот процесс правильно называется по-английски?Лит. источник: Методы исследования углеводов. . - М., «Мир», 1975, 445 с.
Методика силиирования. К точной навеске субстанции, содержащей не более 100 мг сухого остатка (я беру обычно не более 35-40 мг — для прибора полученной концентрации хватает выше крыши, т.к. реально за указанное в книжке время сахара полностью не силанианизируются.) и не более 40 мг воды приливают точно 1,0 мл сухого пиридина. закрывают флакон пробкой и нагревают при 60 ос в течении 30 минут, либо оставляют при комнатной температуре на 12 часов. По завершении растворения в флакон приливают 0,9 мл гексаметилендисилазана (fluka 52620) и, соблюдая осторожность, 0,2 мл трифторуксусной кислоты (fluka 91700) (если прилить сразу, то смесь может закипеть и выплескнуться из пеницилинки). Флакон закрывают пробкой и интенсивно встряхивают в течении 30 секунд, приоткрывают пробку для выхода выделившихся газов, вновь закрывают пробку и оставляют на 1 час при комнатной температуре. Каждые 15 минут флакон интенсивно встряхивают и приоткрывают пробку для выхода образовавшихся газов (пробки удобно приматывать сверху полоской скот ча, что бы их не выбивало).
Условия проведения анализа:
Колонка — стальная длиной 2 м с внутренним диаметром 2 мм.
Носитель Инертон АW 0,315 — 0,400 мм.
Фаза —5% Е-30 (диметилсилоксан). Пробовал также DС-550 -- фенилметилсилоксан (выходили только моносахариды,) и ОV-I01 (вообще ничего толком не получилось, но, возможно потому, что старая была,). Тетрасахаридную фрак цию в патоке я так и не смог увидеть, хотя на ТСХ она определялась.
Газ-носитель — азот. Расход газа-носителя — 30 мл/мин.
Водород —30 мл/мин.
Воздух — 300 мл/мин.
Температура испарителя — 300 С.
Температура детектора — 300 С.
Температурный режим термостата: градиент со 150 С до 300 С со скоростью 10 С в минуту.
ХПЛС тоже с проблемой, первый вкол ничего, потом появляются уже через 30 мин с того же образца непонятные пики. Детектирование нормально идет на 219 нм за счет кислородов.
Мне диплом надо делать с этой штукой... 