хроматографический анализ пептидов

[Mary-shka]

Здравствуйте! Поделитесь информацией по методике хроматографического анализа пептидов, а именно по пробоподготовке фетальной крови!
По известному методу в конце подготовки пробу нужно лиофилизировать. Может быть кто-нибудь знает параметры сушки?
Заранее благодарна!!!!!!!

[Сержл]

Здравствуйте! Поделитесь информацией по методике хроматографического анализа пептидов, а именно по пробоподготовке фетальной крови!
По известному методу в конце подготовки пробу нужно лиофилизировать. Может быть кто-нибудь знает параметры сушки?
Заранее благодарна!!!!!!!

Задача отвратительная, пептиды заклеивают колонки на смерть, потом не смываются ничем, пробуйте на дешевых колонках. Мы так 4 С18 убили за неделю. Про лиофилку спрошу.

[avor]

Здравствуйте! Поделитесь информацией по методике хроматографического анализа пептидов, а именно по пробоподготовке фетальной крови!
По известному методу в конце подготовки пробу нужно лиофилизировать. Может быть кто-нибудь знает параметры сушки?
Заранее благодарна!!!!!!!

Лиофилизация это стандартная процедура, со стандартными условиями, которые описаны в документации к установке. Обычно она подразумевает температуру -20С и вакуум меньше 1мм рт.ст.

С другой стороны, на мой личный взгляд, заниматься анализом пептидов в крови - занятие малопродуктивное.

Ну и я бы особо не заморачивался, а осаждал бы сыворотку 80% метанолом и что в нем растворилось петидного, то и считал бы пептидами.

[Mary-shka]

По нашей методике идет экстракция образца уксусной кислотой с осаждением пептидов ацетоном. По данным позволяет определять 1-10 нМ пептида.
По сушке мы обратились и нам сказали, чтобы мы нашли определенные параметры.

[avor]

По нашей методике идет экстракция образца уксусной кислотой с осаждением пептидов ацетоном. По данным позволяет определять 1-10 нМ пептида.
По сушке мы обратились и нам сказали, чтобы мы нашли определенные параметры.

Ага! Вот мне интересно, от чего можно сушить ацетоновый осадок. От ацетона? Ацетон в раз на водострунике улетит и даже на комнате без вакуума.
Лиофилка подразумевает водные растворы. Если вы сушите водные растворы. То так и скажите этим "сушильщикам". Температура -20, а вакуум максимальный, какой им позволяет их установка в данных условиях.

[Mary-shka]

Нет, нам надо сушить не ацетоновый осадок. Его растворяем в той же уксусной кислоте, затем центрифугируем и сушим (дважды) супернатант.
Кроме того проба не совсем кровь, а плацентарная жидкость.

[абр]

Нет, нам надо сушить не ацетоновый осадок. Его растворяем в той же уксусной кислоте, затем центрифугируем и сушим (дважды) супернатант.

Т.е. вы избавляетесь от уксусной кислоты? Тогда самое простое - в вакуум-эксикаторе над КОН.