синтез конъюгата

[akuviktar]

помогите с методикой синтеза конъюгата: мне надо к молекуле декстрана присоединить МАТ-ТТГ (монокланальное тело к териотропному гормону) и как можно больше молекул пероксидазы хрена. проблема в том, что все вещества-полимеры.

[avor]

помогите с методикой синтеза конъюгата: мне надо к молекуле декстрана присоединить МАТ-ТТГ (монокланальное тело к териотропному гормону) и как можно больше молекул пероксидазы хрена. проблема в том, что все вещества-полимеры.

я бы сначала окислил бы декстран периодатом и слил бы его с каким-нибудь диамином( ГМДА или ЭДА), а потом бы на этот полиамин повязал бы окисленную периодатом ПХ по стандартной методике. А уж потом вязал полученный мега полифермент к антителу. можно использовать какие-нибудь сшивки на аминогруппу(например бисимидаты или биссукцинимидные эфиры), а можно растворимый в воде карбодимид.

Советы между прочим иногда имеют и коммерческий выход.

[Iskander]

ЭДА коротковат и сильно заряжает поверхность. Белок может и денатурировать.
ГМДА лучше, но не радикально. Оба требуют восстановления боргидридом и вообще - связи чувствительны к рН.

Я бы полил окисленный декстран дигидразидом адипинки или другой дикислоты. Потом на него пероксидазу. Остатки гидразидов залить антителом, окисленным периодатом (если не путаю, то на неспецифическом хвосте должен быть углеводный фрагмент)

[avor]

ЭДА коротковат и сильно заряжает поверхность. Белок может и денатурировать.
ГМДА лучше, но не радикально. Оба требуют восстановления боргидридом и вообще - связи чувствительны к рН.

Я бы полил окисленный декстран дигидразидом адипинки или другой дикислоты. Потом на него пероксидазу. Остатки гидразидов залить антителом, окисленным периодатом (если не путаю, то на неспецифическом хвосте должен быть углеводный фрагмент)

Против гидразидов адипинки не возражаю, а вот антитела лучше по аминогруппам вязать.