Коллеги, может у кого есть точная методика, желательно ещё и со ссылкой, как определять такие аминокислоты, как глицин, аланин и т.п. по нингидриновой реакции.
Мне необходима сама методика, типа возьми столько-то и столько-то, прибавь того-то, покипяти столько-то и спектрофотометрируюй, а то не на что опререться, когда обосновываешь свои количества реактивов. Статей вроде полно, а толком нигде не встречал.
Такие вот дела.
Количественное определение аминокислот
Методика количественного определения. 1 г (точную навеску) мелко измельченного сырья заливали 50 мл воды, затем нагревали на водяной бане при температуре 60С° в течение 30 мин. Полученное извлечение фильтровали через бумажный фильтр в мерную колбу на 50 мл, объем доводили водой до метки (раствор А).
1 мл водного экстракта (раствор А) помещали в мерную колбу объемом 25 мл и добавляли равное количество 0,2%-ного свежеприготовленного спиртового раствора нингидрина. Смесь нагревали на водяной бане при температуре 60С° в течение 30 мин. После чего охлаждали до комнатной температуры и доводили до метки водой (раствор Б). Оптическую плотность полученного раствора измеряли на спектрофотомере СФ-46 при длине волны 570 нм (кювета с толщиной слоя 10 мм).
В качестве раствора сравнения использовали водный экстракт, приготовленный путем разбавления 1 мл в мерной колбе до объема 25 мл.
взято отсюда:
http://www.nioch.nsc.ru/mirrors/press/c ... 01_081.pdf
1 мл водного экстракта (раствор А) помещали в мерную колбу объемом 25 мл и добавляли равное количество 0,2%-ного свежеприготовленного спиртового раствора нингидрина. Смесь нагревали на водяной бане при температуре 60С° в течение 30 мин. После чего охлаждали до комнатной температуры и доводили до метки водой (раствор Б). Оптическую плотность полученного раствора измеряли на спектрофотомере СФ-46 при длине волны 570 нм (кювета с толщиной слоя 10 мм).
В качестве раствора сравнения использовали водный экстракт, приготовленный путем разбавления 1 мл в мерной колбе до объема 25 мл.
взято отсюда:
http://www.nioch.nsc.ru/mirrors/press/c ... 01_081.pdf
Даже не пытайся бежать - умрешь уставшим!
Кто сейчас на конференции
Сейчас этот форум просматривают: нет зарегистрированных пользователей и 39 гостей