предколонки для ВЭЖХ

[petrovps]

Доброе время суток!

Коллеги, нужен совет. Возникла необходимость количественного определения некоторых лек. препаратов в плазме на ЖХ/МС. знакомый посоветовал использовать предколонку дл продления жизни колонки, т.к. в плазме много различных белков. Подскажите, пожалуйста, какие предколонки нужны в нашем случае? И у кого лучше купить?

Спасибо!

[абр]

Доброе время суток!
какие предколонки нужны в нашем случае? И у кого лучше купить?

Предколонки, рекомендованные производителем колонки У кого покупать - без разницы, смотрите по срокам поставки и цене.

[Deminolog]

Здравствуйте!
Коллега абр прав Просто расшифрую, что имеется в виду
Смотрите, к каждому виду колонок производители выпускают соответствующие предколонки. Например, у Вас колонка Phenomenex Luna C18, 5 мкм. Вы же не возьмете предколонку с обычным силикагелем, правильно? А возьмете предколонку с таким же сорбентом. Кроме того, обращаю Ваше внимание на то, что желательно использовать именно такой же сорбент (не аналогичный, а идентичный), чтобы минимизировать вклад предколонки на результат. Наличие предколонки итак приводит к определенному уширению пика (особенно заметно в УВЭЖХ), зачем еще добавлять... Да и технологии изготовления у разных производителей разные...
А Вы не пробовали чистить пробы? Плазма - гадость та еще. Я бы задумался о том, как избавится от белков. А раз у Вас вообще ВЭЖХ-МС, то попробовал бы несколько схем: к пробе плазмы добавил бы метанол:0,1% муравьинку (50:50), чтобы вызвать денатурацию белка, отцентрифугировал, отобрал супернатант и анализировал бы. От всего не избавиться так, но от части - можно. Если аналиту ничего не будет, конечно. А в идеале еще добавил бы стадию ТФЭ. Причем с сорбентом, аналогичным сорбенту колонки. Что сядет необратимо на патрон - то необратимо сядет и на колонку. Только вот стоимость патрончика и колонки сопоставить даже нельзя Но это так, взгляд дилетанта со стороны

[petrovps]

Спасибо за развернутый ответ! Будем искать предколонки соответствующие колонкам. Относительно очистки проб: предложенный Вами вариант хорош, но трудоемок, т.к. проб у нас ~600 штук.

[Deminolog]

Тогда все же советую задуматься вдвойне. Дело в том, что предколонка будет защищать до определенного момента... Да и предколонки не так уж и дешевы, лучше заняться очисткой проб. Хотя бы высадить белок.
Советую не из вредности, честное слово Но решать Вам

[petrovps]

Понимаю, что предколонка не вечная. Хотелось избежать рутины, но так и придется высаживать белки. Спасибо, Deminolog, за советы!

[StYV]

Для начала посмотреть в статьях пробоподготовку для этих препаратов.
Далее пробы можно готовить:
- экстракцией препаратов;
- твердофазной экстракцией на патронах;
- фильтрованием через мембранные фильтры, например, фирмы Амикон (там фильтры и устройство для фильтрования центрифугированием).
Самый дешевый вариант набивать предколонки таким сорбентом - CoPell ODS (пользуюсь таким, размер предколонки 30х2.1 мм, пакуется насыпанием всухую).
С уважением StYV.