Хранение раствора ацетата лития
Хранение раствора ацетата лития
Трансформирую дрожжи.
Года полтора был перерыв, потребовалось затрансформировать, неудача. Поменял растворы среды, PEG поменял (он кончился), перештриховал еще раз культуру, снова неудача.
Единственное, что не менял - ацетат лития. У меня очень старый раствор, доставшийся еще от коллеги. Одномолярный сток. Но полтора года назад еще работал. Свой тогда не хотел готовить т.к. новая партия ацетата лития была с каким-то мерзким ржавым осадком, и, хотя он и удалялся при фильтрации, трансформация с этим ацетатом лития была неудачной.
Один из коллег заявил, что у него неудачи с трансформацией уходили главным образом после замены PEGа и лития (но кроме него на литий никто не грешит)
Интересно, что может гипотетически происходить с ацетатом лития при хранении на столе в пластике, причем раствор стерилизован фильрацией 0.22 мкм? (хотя стерильность могла нарушится, не могу ручаться. Но тогда бы на чашках был бы виден зарост, полагаю).
pH померяю, как руки дойдут
Года полтора был перерыв, потребовалось затрансформировать, неудача. Поменял растворы среды, PEG поменял (он кончился), перештриховал еще раз культуру, снова неудача.
Единственное, что не менял - ацетат лития. У меня очень старый раствор, доставшийся еще от коллеги. Одномолярный сток. Но полтора года назад еще работал. Свой тогда не хотел готовить т.к. новая партия ацетата лития была с каким-то мерзким ржавым осадком, и, хотя он и удалялся при фильтрации, трансформация с этим ацетатом лития была неудачной.
Один из коллег заявил, что у него неудачи с трансформацией уходили главным образом после замены PEGа и лития (но кроме него на литий никто не грешит)
Интересно, что может гипотетически происходить с ацетатом лития при хранении на столе в пластике, причем раствор стерилизован фильрацией 0.22 мкм? (хотя стерильность могла нарушится, не могу ручаться. Но тогда бы на чашках был бы виден зарост, полагаю).
pH померяю, как руки дойдут
Re: Хранение раствора ацетата лития
Что вы там трансформируете ? Генная инженерия ?
Инженер человеческих душ ?
Вы походу там на своей волне ?
Инженер человеческих душ ?
Вы походу там на своей волне ?
Re: Хранение раствора ацетата лития
Ну в целом да, плазмиды ввожу.
Двугибридка, Y2H.
Суть - у дрожжей есть GAL-активатор, его можно поделить на активационный и ДНК-связывающий домены. Экспрессировать отдельно, пришив к ним какие-то свои белковые фрагменты. Если фрагменты взаимодействуют, то из них собирается целый активатор. В геноме дрожжей убит ряд генов, отвечающих за синтез аминокислот и оснований ДНК. Дрожжи после трансформации (и отбора по аминокислотам, гены синтеза которых приходят с плазмидами) штрихуют на более селективную среду и смотрят, как они будут расти (== взаимодействуют ли исследуемые фрагменты или нет).
Re: Хранение раствора ацетата лития
Ацетат лития могут кушать микробы ....
А учитывая что он стоит копейки и все эти генные манипуляции довольно затратны ...проще и надежнее сделать новый раствор.
А учитывая что он стоит копейки и все эти генные манипуляции довольно затратны ...проще и надежнее сделать новый раствор.
- Jokermaniak
- Сообщения: 3075
- Зарегистрирован: Чт окт 02, 2014 4:41 pm
Re: Хранение раствора ацетата лития
Ацетаты зацветают только в путь. За потора года без стерилизации с гарантией заведется всякая фауна.
Что, Карл Маркс запрещает держать на лестнице ковры? Разве где-нибудь у Карла Маркса сказано, что 2-й подьезд калабуховского дома на Пречистенеке следует забить досками и ходить кругом через черный двор?
Re: Хранение раствора ацетата лития
Тогда лучше хранить крепкий раствор, близкий к насыщенному.
"Я не видел людей страшней, чем толпа цвета хаки"
Re: Хранение раствора ацетата лития
А как бактерии выживают в таком избытке литиевых катионов? Это же полное нарушение нормального баланса электролитов клетки.
Wodka trinkt man pur und kalt, das macht hundert Jahre alt!
Re: Хранение раствора ацетата лития
Запросто выживают ..... вспоминаем бактерии в "черных курильщиках"
- Jokermaniak
- Сообщения: 3075
- Зарегистрирован: Чт окт 02, 2014 4:41 pm
Re: Хранение раствора ацетата лития
Не помогает, к сожалению.
А может там и не бактерии, а грибы. Или археи. Я ХЗ, кто именно заводится, они обычно не представляются. Но у меня есть такое подозрение, что их клеточные стенки достаточно непроницаемые.
Что, Карл Маркс запрещает держать на лестнице ковры? Разве где-нибудь у Карла Маркса сказано, что 2-й подьезд калабуховского дома на Пречистенеке следует забить досками и ходить кругом через черный двор?
Re: Хранение раствора ацетата лития
Традиционно сток 1М
Ну исходно он фильтрованныйJokermaniak писал(а): ↑Вс фев 19, 2023 7:34 pmАцетаты зацветают только в путь. За потора года без стерилизации с гарантией заведется всякая фауна.
Зарастает почти что угодно (разве что хлорид натрия не зарастал и всякие такие штуки), мне интереснее, что они там жрут, откуда азот, фосфат? Я не ожидал совершенно.
А насчет баланса ионов - вопрос энергетической цены, у них специальные белки лишние ионы выкидывают из клетки, а дефицитные закачивают. У кого-то специальные приспособления есть, чтобы лишее меньше попадало внутрь, ну экстремофилы, жизнь в солончаках и т.д.
Взял литий у коллеги, еще больше ДНК взял на трансформацию и кое-какие условия поменял. Эффективность резко выросла, неясно пока за счет чего, ну это как-нибудь потом выясню, поставив контроли в другой раз (сейчас я тоже поставил, но чуть более экзотические рекомендации проверял. Кое-какие из них дали положительный эффект).
- Jokermaniak
- Сообщения: 3075
- Зарегистрирован: Чт окт 02, 2014 4:41 pm
Re: Хранение раствора ацетата лития
Вы так говорите, как будто это что-то меняет.
Что, Карл Маркс запрещает держать на лестнице ковры? Разве где-нибудь у Карла Маркса сказано, что 2-й подьезд калабуховского дома на Пречистенеке следует забить досками и ходить кругом через черный двор?
Re: Хранение раствора ацетата лития
Дык бактерии-экстремалы из термоисточников вряд ли будут витать в воздухе лаборатории?
Wodka trinkt man pur und kalt, das macht hundert Jahre alt!
- Jokermaniak
- Сообщения: 3075
- Зарегистрирован: Чт окт 02, 2014 4:41 pm
Re: Хранение раствора ацетата лития
А почему именно из термоисточников? Вроде как ТС свой раствор не горячим хранит.
Что, Карл Маркс запрещает держать на лестнице ковры? Разве где-нибудь у Карла Маркса сказано, что 2-й подьезд калабуховского дома на Пречистенеке следует забить досками и ходить кругом через черный двор?
Кто сейчас на конференции
Сейчас этот форум просматривают: нет зарегистрированных пользователей и 46 гостей